Phalloidin-TRITC是一种红橙荧光细胞骨架染色剂，它结合并标记F-actin（激发/发射值λ~540/565nm）。建议将小瓶内容物溶于1.5毫升甲醇或二甲基亚砜中，制成本品的储备溶液。
产品名称：罗丹明标记鬼笔环肽|TRITC
Phalloidin
分子式：C60H70N12O13S2
分子量：1231.4
CAS：915013-10-4
运输与保存方法：
冰袋运输。-20℃避光干燥保存，
1年有效。
需要自备材料：
1）
（可选）甲醇
2）
1×PBS
缓冲液,
pH
7.4,
细胞培养级别
3）
固定液
4%多聚甲醛（溶于
PBS
缓冲液）
4）
丙酮或透化液
0.5%
Triton
X-100（溶于
PBS
缓冲液）
5）
Fluoromount-GTM
水溶性封片剂（不含
DAPI）DAPI
6）
（可选）DAPI
Fluoromount-GTM
水溶性封片剂（含
DAPI）
7）
（可选）BSA，标准级
8）
载玻片和盖玻片
9）
盖玻片周围密封液（如透明指甲油）
10）组装有
TRITC
激发/发射滤片，以及
DAPI
激发/发射滤片的荧光显微镜或共聚焦显微镜。
操作步骤：
1.工作液准备
1）对于
TRITC
标记鬼笔环肽
本品以溶于甲醇的
20M
储存液形式提供，总量为
300L。按照
100
nM
的工作液浓度来换算，可制备总量为
60
mL
的工
作液。建议收到产品后，根据单次使用量，对母液进行小量分装，-20℃避光冻存，一年稳定。
开始实验前，使用
1×PBS
缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为：80~200nM。工作液现配现用。
2）对于
TRITC
标记鬼笔环肽
本品以冻干粉形式提供，分子量为
1231.4，总量为
1mg。可先用甲醇或者
DMSO
充分溶解配制成
20~100M
的储存液。
如，加入
8.1208mL
甲醇到
1mg
鬼笔环肽即得到
100M
等量的储存液，根据单次使用量，进行小量分装，-20℃避光冻
存，一年稳定。
开始实验前，使用
1×PBS
缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为：80~200nM。工作液现配现用。
2.染色步骤
1）细胞爬片生长
24h，使其密度达到
50%汇合度。
2）吸掉培养液，37℃预热的
1×PBS（pH
7.4）清洗细胞
2
次。
3）使用溶于
PBS
的
4%甲醛溶液进行细胞固定，室温固定
10min。
注：避免固定剂中含有甲醇成分，因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。
4）室温条件下，用
PBS
清洗细胞
2~3
次，每次
10min。
5）室温条件下，用丙酮（≤-20℃）脱水或者用
0.5%
Triton
X-100
溶液透化处理
5min。
6）室温条件下，用
PBS
清洗细胞
2~3
次，每次
10min。
7）取
200l
配制好的
TRITC
标记鬼笔环肽工作液，覆盖住盖玻片上的细胞，室温避光孵育
30min（通常情况下，4℃~37℃
孵育皆可）。
注：为了降低背景，可于
TRITC
标记的鬼笔环肽工作液内加入
1%
BSA；另外，孵育过程中为了避免溶液挥发，可
将盖玻片转移到一个密封的容器内。
8）用
PBS
清洗盖玻片
3
次，每次
5min。
9）使用
200l
DAPI
溶液（浓度：100
nM）对细胞核进行复染，约
30s。
10）用
PBS
清洗盖玻片，然后倒置在已经滴有一滴
Fluoromount-GTM
水溶性封片剂的载玻片上。使用纸巾轻轻檫掉多余封
片剂，然后用指甲油永久封片。此法制备的标本玻片可置于
4℃避光保存，通常
6
个月内可继续做
F-actin
染色分析。
注：也可以直接使用含有
DAPI
的抗荧光淬灭封片剂合并步骤
9）10），简化步骤。
11）荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察，选择
TRITC
激发/发射滤片（Ex/Em=545/570nm）和
DAPI
激发/发射滤
片（Ex/Em=364/454nm）。
其它相关产品：
Amino-Phalloidin
FITC-Phalloidin
TRITC-Phalloidin
5-TAMRA
Phalloidinl
iFluor350-Phalloidin
iFluor405
Phalloidin
iFluor488Phalloidin
iFluor555
Phalloidin
iFluor594
Phalloidin
iFluor647
Phalloidin
iFluor680
Phalloidin
iFluor790
Phalloidin
Cyanine3-Phalloidin
Cyanine3.5-Phalloidin
Cyanine5-Phalloidin
Cyanine5.5-Phalloidin
Cyanine7-Phalloidin
ICG-Phalloidin
西安瑞禧生物科技有限公司温馨提示您
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作，本产品仅作科研用途！