荧光标记抗体的分类选择

一般来讲，耦联到二抗上的探针主要有：

酶(辣根过氧化酶-HRP 和碱性磷酸酶-AP或其衍生物，荧光基团(FITC、RRX、TR、PE、Rhodamine)生物素等

选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验，对于Western Blot和FLISA，***常用的二抗是酶标二抗，而细胞或组织标记实验(细胞免疫化学，组织免疫化学，流式细胞术)中通常使用荧光标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号，可以使用 Biotin/Avidin 检测系统。其中荧光素是具有光致荧光特性的染料，荧光染料种类很多，目前常用于荧光标记二抗有以下几种:

异硫氰酸荧光素-(FITC)

四甲基异硫氰酸罗丹明-(TRITC)、X(RRX)、Texas Red(TR)

菁类染料-(Cy2,Cy3,Cy5)

藻红蛋白或藻胆色素蛋白-(PE)

Aminomethylcoumarin Acetate (AMCA)