产品概述

纳米金偶联试剂盒可以通过蛋白(包括多肽、抗体、酶等)上的伯胺基团(如赖氨酸)，简单、快速地实现蛋白与纳米金的共价偶联。此为通用型试剂盒，适合各种分子量不一致的蛋白偶联纳米金。纳米金共轭过程的操作时间约为3分钟，共轭在30分钟内就可以完成。 

该试剂盒中的纳米颗粒以冻干混合物的形式提供。通过将冻干的金纳米颗粒与蛋白重新组合，蛋白(通过赖氨酸残基)附着在金纳米颗粒表面，即可开始偶联反应。

由此得到共价偶联的纳米金蛋白结合物，与被动吸附法相比，蛋白更加稳定地结合在纳米金表面。此外，与被动方法不同，包被过程与蛋白的等电点无关，因此无需在不同pH值下进行大量试验。所有蛋白都可以在单一pH值下进行标记。       

优点

1、 操作简单，仅需3分钟的操作时间，反应快速，30分钟即可完成   

2、 试剂盒中的纳米颗粒可以冻干混合物的形式提供，可长期保存    

3、 纳米金颗粒为均匀的球形形状和，尺寸分布狭窄的，实验结果重现性好    

试剂盒组成与存储

收到后将试剂盒储存在-20⁰C。偶联剂、反应缓冲液可保存在+4℃    

实验步骤

1、 把所有的试剂加热到室温。

2、 取1份纳米金分散于1mL缓冲溶液，取一份偶联试剂溶解于500uL纯水中。 

3、 取抗体/蛋白加入纳米金缓冲溶液中，在该混合溶液中，再加入500uL偶联试剂，然后，将反应混合物在室温下持续30分钟左右。

4、 反应结束后以9500rpm，离心20分钟，纯水洗涤2~3次以除去未反应完的抗体或蛋白。

5、 共轭抗体储存:

标记抗体后，我们建议将偶联物储存在 +4°C。不要将偶联物储存在 -20°C。纳米颗粒和抗体之间的键是共价键，这意味着偶联物非常稳定。

偶联物的整体稳定性将由抗体本身的稳定性决定，因为它会首先降解。如果您的抗体稳定，偶联物也将稳定。    

6、 测量共轭浓度:

20 nm金的***大吸光度(Absmax)为528 nm。   

为了确定获得的偶联物的有效浓度，我们建议在将样品稀释到适合您的设备的适当范围后，使用紫外-可见分光光度计测量 Absmax。   

注意事项

1、请参阅下表推荐的缓冲条件和组成部分:

相对较弱的缓冲液(如25mM)是***，这样在加入抗体后共价反应的pH条件不会发生明显改变。            

2、抗体的数量和体积:

***佳抗体量(这将影响每个粒子的抗体分子数量)取决于纳米颗粒的大小(表面积)和应用;因此，你可能需要结合不同数量的抗体来优化你的试验。下表显示了推荐的初始抗体量。         

但是，稍微降低或提高浓度可以优化特定应用程序的性能。此外，对于某些抗体，在结合前将反应缓冲液在水中按1:5稀释可能有利于结合反应